HepG2细胞系介绍
HepG2细胞（HEPG2）是一种具有上皮样形态的细胞系，来源于一名15岁阿根廷白人男性肝细胞癌患者的肝组织。这种细胞系能够分泌多种血浆蛋白，包括清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原及铁传递蛋白等。由Wistar研究所获得的HepG2细胞被视为理想的转染宿主，其标志物包括胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。

HepG2细胞的生长特性通常表现为贴壁生长，细胞最初会附着在培养瓶壁形成小岛状结构，随着时间的推移，细胞可能会出现多层堆积或悬浮状态。由于其较强的贴壁性，这一细胞系常用于肝细胞功能及病毒模型的研究。

细胞培养条件
HepG2细胞的培养条件相对严格，推荐使用87% MEM（含NEAA）、10%进口胎牛血清、1% L-alanyl-L-glutamine、1%丙酮酸钠及1%双抗的完全培养基。培养环境需要保持在37℃、95%空气和5%二氧化碳的条件下。

传代培养
对于贴壁生长的HepG2细胞，当观察到细胞有脱落时，应将培养液转移至无菌离心管进行离心处理。随后，轻柔去除培养基，用PBS洗涤贴壁细胞并进行消化。当大部分细胞脱落后，应立即加入完全培养基以中和消化酶，并轻柔吹打以使细胞完全解离。最后，将细胞重悬至适当的浓度，转移至新的培养瓶中，继续静置培养。

细胞冻存与复苏
优质的细胞冻存液是HepG2细胞长时间保存的关键。在经历细胞培养处理后，当细胞密度达到80%以上，且活细胞比例超过95%时，应将细胞进行收集并重悬于适量的冻存液中并置于-80℃保存。复苏时，应迅速将冻存管在37°C水浴中解冻，并在无菌环境下进行细胞转移与计数，确保细胞密度适宜。

注意事项与常见问题
HepG2细胞在培养过程中出现的细胞碎片和空泡现象属于正常现象。对于生长缓慢的情况，可能需要调整血清浓度或检查培养条件的适宜性。若细胞聚团或不易贴壁，建议使用高质量低内毒素的胎牛血清并保持合适的培养pH值。

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相关文献
截至2024年，HepG2细胞系列的研究文献已达72篇，影响因子总和为46707，证明了其在生物医疗研究中的广泛应用及重要性。